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德国小蠊重组变应原(rBla g 2)治疗过敏性哮喘小鼠的实验研究
作者: 沈小英, 朱清仙, 刘志刚, 李湘辉 主题: 德国小蠊, 重组变应原, 哮喘, 嗜酸粒细胞, B淋巴细胞瘤/白血病-2 年份: 2009
摘要: 目的探讨重组德国小蠊变应原(rblag2)治疗过敏性哮喘小鼠的效果及机制。方法18只balb/c小鼠随机均分为阴性对照组(a组)、哮喘模型组(b组)和重组蛋白rblag2治疗组(c组)。b、c两组分别腹腔注射经al(oh)3佐剂乳化的重组蛋白rblag2,剂量为50mg/(只·次),共3次,每次间隔1周。a组以50ml生理盐水代替变应原。末次致敏后2周,进行免疫治疗,c组腹腔注射rblag2,100mg/(只·次),每两天1次,连续8次。a、b两组以pbs代替变应原。末次治疗后1周,将小鼠麻醉,b、c两组每鼠每天滴鼻50mgrblag2,连续7d。a组以pbs代替变应原滴鼻。于最后1次滴鼻后24h检测各项指标:各组小鼠气道高反应性,支气管肺泡灌洗液(balf)中细胞总数和细胞种类以及血清中rblag2抗原特异性ige和igg2a的变化;he染色观察小鼠肺组织的改变,免疫组化检测肺嗜酸粒细胞(eos)b淋巴细胞瘤/白血病-2(bcl-2)的表达。结果与b组相比,c组气道高反应检测中扩大间隙(penh)值下降(p<0.05);血清中rblag2特异性ige降低,igg2a增加(p<0.01);c组eos细胞阳性数量明显减少,且bcl-2蛋白阳性表达较弱。b组balf的细胞总数和eos数分别为(24.60±15.08)×105个/ml和(22.20±3.76)×105个/ml,而c组细胞总数[(14.30±4.95)×105个/ml]和eos数[(5.20±1.56)×105个/ml]显著减少(p<0.01)。b组肺部气管周围炎性细胞聚集,肺组织上皮损伤,组织水肿,而c组肺部变应性炎症明显减轻。与a组相比,c组各项检测指标接近a组。结论rblag2对小鼠过敏性哮喘有治疗作用,可能是eos细胞凋亡在其中起重要作用。
Bla g 7多肽疫苗免疫治疗小鼠过敏性气道炎症的研究
作者: 夏立新, 马慧, 刘志刚, 吴海强, 冉丕鑫, 钟南山 主题: Bla g 7, 多肽, 纳米微粒, 过敏性气道炎症, 小鼠 年份: 2009
摘要: 目的观察以壳聚糖(cs)材料为佐剂制备的德国小蠊变应原bla g 7多肽纳米疫苗对小鼠过敏性气道炎症的疗效,探讨其免疫机制。方法用cs包裹bla g 7多肽制成纳米疫苗;25只balb/c小鼠用蟑螂粗提液致敏、激发,随机分为阴性对照组(a组)、模型组(b组)、bla g 7多肽治疗组(c组)、bla g 7多肽+cs治疗组(d组)、cs对照(e组)。通过he染色观察小鼠肺部炎症;观察支气管肺泡灌洗液(balf)中细胞总数和细胞分类;气道高反应仪监测治疗前后小鼠气道高反应性的变化。结果成功制备bla g 7多肽纳米疫苗;d组与a组相比肺部病理改变不明显,balf中的细胞总数、eos计数均显著低于模型组(p<0.01),而c组和e组对致敏小鼠无明显疗效。气道高反应数值治疗前后变化差别有统计学意义(p<0.05)。结论bla g 7多肽壳聚糖纳米疫苗对致敏小鼠具有免疫治疗作用,是一种新型的治疗蟑螂过敏性气道炎症的缓释制剂,为脱敏疫苗的研究提供了理论基础。
真核表达与原核表达的德国小蠊变应原Bla g 2蛋白结构的光谱学研究
作者: 刘志刚, 朱健琦, 黄海珍, 徐宏 主题: 德国小蠊, 变应原, Bla g 2, 真核表达, 原核表达, 荧光光谱, CD谱 年份: 2006
摘要: 在基因工程技术中,采用原核表达系统获得的重组蛋白是以包涵体的形式存在,在细胞内聚集成无生物活性的不溶性颗粒,而采用真核表达系统收获的蛋白已经是经过正确的体内折叠的活性蛋白。文章分别用真核与原核表达系统表达重组变应原,通过对不同来源目的蛋白的荧光光谱和cd谱的比较和分析,对真核系统与原核系统表达出的bla g2蛋白的高级构象进行研究,阐明了bla g2在溶液中的二级结构,并推断出其三级结构组成类型。
德国小蠊主要变应原Bla g 2抗原定位的研究
作者: 包莹, 李盟, 刘志刚 主题: 德国小蠊, 重组变应原Bla g 2, 荧光抗原定位 年份: 2007
摘要: 目的探讨过敏性疾病主要变应原之一德国小蠊bla g 2的定位。方法制作德国小蠊石蜡切片,在本室克隆、表达和纯化出bla g 2蛋白的基础上,按常规方法免疫小鼠,分离血清用作一抗,荧光染色后在光镜下观察bla g 2在虫体内的定位。结果用rbla g 2免疫小鼠血清孵育的切片中,中肠肠腔上皮细胞和肠内容物显示强阳性,免疫小鼠血清孵育的粪便颗粒也显示阳性结果。而其生殖、排泄系统等脏器均呈阴性反应。结论本研究发现德国小蠊ii类变应原bla g 2存在于中肠肠腔上皮组织、肠内容物和粪便颗粒中,对进一步进行德国小蠊特异性抗原的分离、纯化及疫苗的研究提供了理论参考。
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